Transwell检测细胞迁移

Transwell检测细胞迁移是一种在体外模拟细胞迁移行为的实验方法，它使用Transwell小室来实现这一目的。Transwell小室通常由一个上室和一个下室组成，中间由一个多孔的聚碳酸酯膜或胶原涂层膜分隔。Transwell细胞迁移实验广泛应用于癌症研究、发育生物学、免疫学等领域，用于研究细胞迁移的机制、评估肿瘤细胞的侵袭能力以及筛选影响迁移的药物。

基本步骤

一、准备工作：

1. 选择合适的Transwell小室：根据实验需求选择合适孔径的Transwell小室（通常是8μm或12μm孔径用于迁移实验，而24μm孔径常用于侵袭实验）。

2. 细胞培养：将细胞培养至对数生长期。

3. 制备细胞悬液：用无血清培养基重悬细胞，并调整细胞浓度。

二、实验步骤：

1. 接种细胞：将细胞悬液加入Transwell小室的上室，确保细胞均匀分布。

2. 添加趋化剂：在下室加入含有血清或特定趋化因子的培养基，以吸引细胞向下室迁移。

3. 迁移：将Transwell小室放入培养箱中，根据实验设计孵育一定时间（通常为16-24小时）。

4. 终止迁移：孵育时间结束后，取出Transwell小室。

5. 清除未迁移细胞：使用棉签或PBS轻轻擦去上室表面的未迁移细胞。

6. 固定：用甲醇或甲醛固定迁移到膜下的细胞。

7. 染色：使用结晶紫、吉姆萨染液或其他细胞染色剂对迁移到膜下的细胞进行染色。

8. 清洗：用PBS清洗多余的染料。

9. 图像获取：将Transwell膜置于显微镜下，拍摄迁移细胞的图像。

10. 细胞计数和分析：计数迁移到膜下特定区域的细胞数量，或者使用图像分析软件进行定量分析。

三、数据分析：

1. 通过比较不同实验组之间的细胞迁移数量，可以评估细胞迁移能力的差异。

2. 可以进行统计分析（如t检验或ANOVA）来确定结果的显著性。

注意事项

1. 确保细胞密度适宜，过密或过稀都会影响实验结果。

2. 轻柔操作以避免损伤细胞或破坏Transwell膜。

3. 实验条件（如孵育时间、细胞密度、趋化剂浓度）需要标准化，以确保实验的可重复性。

提供信息

1. 细胞类型，客户是否提供细胞，细胞能否进行Transwell检测，一般悬浮细胞不建议进行该实验；

2. 客户是否提供Transwell孔板；

3. 是否需要进行药物处理或敲除过表达处理，敲除或过表达处理是否提供相关载体；

4. 检测时间。

测试价格

1. 细胞株 400/株，贴壁细胞80元培养至6孔细胞量，悬浮细胞100元培养至6孔细胞量；客户提供300/株适应性培养1-2周；

2. 药物处理费用一个药物150元，载体转染费用一个载体60元；

3. 细胞迁移费用250元/细胞/处理。